Pneumoccus é caracterizada por colónias suaves que possuem uma cápsula polissacárida que induz a formação de anticorpos; os diferentes tipos são classificados de acordo com a sua especificidade imunológica.o processo de purificação que Avery empreendeu consistiu em matar primeiro as bactérias com calor e extrair os componentes solúveis em solução salina. Em seguida, a proteína foi precipitada usando clorofórmio e as cápsulas polissacáridas foram hidrolisadas com uma enzima., Foi utilizada uma precipitação imunológica causada por anticorpos específicos do tipo para verificar a destruição completa das cápsulas. Em seguida, a porção ativa foi precipitada por fraccionamento de álcool, resultando em fios fibrosos que poderiam ser removidos com uma vara de agitação.a análise química mostrou que as proporções de carbono, hidrogênio, nitrogênio e fósforo nesta porção ativa eram consistentes com a composição química do DNA., Para mostrar que era DNA ao invés de uma pequena quantidade de RNA, proteína, ou algum outro componente celular que foi responsável pela transformação, Avery e seus colegas usaram uma série de testes bioquímicos. Eles descobriram que tripsina, quimotripsina e ribonuclease (enzimas que quebram além de proteínas ou RNA) não o afeta, mas uma preparação enzimática de “deoxyribonucleodepolymerase” (um bruto, preparação, obtidos a partir de um número de fontes animais, que poderia quebrar o DNA) destruiu o extrato do poder de transformação.,

acompanhamento de obra, em resposta a críticas e desafios incluem a purificação e cristalização, por Moisés Kunitz em 1948, de um DNA depolymerase (deoxyribonuclease eu), e preciso trabalhar por Rollin Hotchkiss, mostrando que praticamente todos os detectado em azoto purificado DNA veio de glicina, a repartição do produto da da base de dados de nucleotídeos de adenina, e que não detectados proteína de contaminação foi no máximo de 0,02% por Hotchkiss estimativa.,

Os resultados experimentais da Avery–MacLeod–McCarty experimento foram rapidamente confirmada e estendida a outras características hereditárias além de polissacarídeo cápsulas. No entanto, houve uma relutância considerável em aceitar a conclusão de que o ADN era o material genético. De acordo com a influente “hipótese tetranucleotídica” de Phoebus Levene, o DNA consistia em unidades repetitivas das quatro bases nucleotídicas e tinha pouca especificidade biológica., Pensava-se, portanto, que o ADN era o componente estrutural dos cromossomas, ao passo que se pensava que os genes seriam provavelmente feitos do componente proteico dos cromossomas. Essa linha de pensamento foi reforçado pelo 1935 cristalização do vírus do mosaico do tabaco por Wendell Stanley, e os paralelos entre os vírus, os genes e enzimas; muitos biólogos pensamento genes podem ser uma espécie de “super-enzima”, e os vírus foram apresentados de acordo com Stanley para ser proteínas e partilhar a propriedade de autocatalysis com muitas enzimas., Além disso, poucos biólogos pensaram que a genética poderia ser aplicada às bactérias, uma vez que lhes faltavam cromossomas e reprodução sexual. Em particular, muitos dos geneticistas conhecido informalmente como o fago grupo, que viria a se tornar influentes na nova disciplina da biologia molecular nos anos de 1950, foram desprezo do DNA como material genético (e foram inclinados para evitar o “confuso” bioquímica abordagens de Avery e seus colegas)., Alguns biólogos, incluindo o colega do Instituto Rockefeller Alfred Mirsky, desafiaram a descoberta de Avery de que o princípio transformador era ADN puro, sugerindo que os contaminantes proteicos eram responsáveis. Embora a transformação tenha ocorrido em alguns tipos de bactérias, ela não poderia ser replicada em outras bactérias (nem em quaisquer organismos superiores), e seu significado parecia limitado principalmente à medicina.cientistas olhando para trás sobre a experiência Avery-MacLeod-McCarty discordaram sobre o quão influente foi na década de 1940 e início da década de 1950., Gunther Stent sugeriu que ele foi amplamente ignorado, e só comemorado depois—da mesma forma que o trabalho de Gregor Mendel décadas antes da Ascensão da genética. Outros, como Joshua Lederberg e Leslie C. Dunn, atestam o seu significado inicial e citam o experimento como o início da Genética molecular.alguns microbiólogos e geneticistas tinham se interessado pela natureza física e química dos genes antes de 1944, mas o experimento Avery–MacLeod–McCarty trouxe um interesse renovado e maior no assunto., Embora a publicação original não mencionasse especificamente a genética, Avery, bem como muitos dos geneticistas que leram o artigo, estavam cientes das implicações genéticas—que Avery pode ter isolado o próprio gene como ADN puro. O bioquímico Erwin Chargaff, o geneticista H. J. Muller e outros elogiaram o resultado como estabelecendo a especificidade biológica do DNA e como tendo implicações importantes para a genética se o DNA desempenhou um papel semelhante em organismos superiores. Em 1945, a Royal Society concedeu a Avery a Medalha Copley, em parte por seu trabalho na transformação bacteriana.,

entre 1944 e 1954, o artigo foi citado pelo menos 239 vezes (com citações espalhadas uniformemente por esses anos), principalmente em artigos sobre Microbiologia, imunoquímica e bioquímica. Além do trabalho de acompanhamento de McCarty e outros no Instituto Rockefeller em resposta às críticas de Mirsky, o experimento estimulou um trabalho considerável em microbiologia, onde lançou uma nova luz sobre as analogias entre a hereditariedade bacteriana e a genética dos organismos reprodutivos sexualmente., O microbiologista francês André Boivan alegou estender os achados de transformação bacteriana de Avery para Escherichia coli, embora isso não pudesse ser confirmado por outros pesquisadores. Em 1946, no entanto, Joshua Lederberg e Edward Tatum demonstraram conjugação bacteriana em E. coli e mostraram que a genética poderia se aplicar a bactérias, mesmo que o método específico de transformação de Avery não fosse geral. O trabalho de Avery também motivou Maurice Wilkins a continuar os estudos cristalográficos de raio-X do DNA, mesmo quando ele enfrentou a pressão dos financiadores para focar sua pesquisa em células inteiras, ao invés de biomoléculas.,apesar do número significativo de citações ao artigo e das respostas positivas recebidas nos anos seguintes à publicação, o trabalho de Avery foi negligenciado por grande parte da comunidade científica. Embora recebido positivamente por muitos cientistas, o experimento não afetou seriamente a pesquisa genética mainstream, em parte porque fez pouca diferença para experimentos de genética clássica em que os genes foram definidos por seu comportamento em experimentos de reprodução ao invés de sua composição química. H. J., Muller, embora interessado, foi focado mais em estudos físicos do que Químicos do gene, como foram a maioria dos membros do grupo FAG. O trabalho de Avery também foi negligenciado pela Fundação Nobel, que mais tarde expressou o arrependimento público por não ter atribuído um Prêmio Nobel a Avery.

By the time of the 1952 Hershey–Chase experiment, geneticists were more inclined to consider DNA as the genetic material, and Alfred Hershey was an influential member of the phage group., Erwin Chargaff tinha mostrado que a composição base do DNA varia por espécie (ao contrário da hipótese do tetranucleótido), e em 1952 Rollin Hotchkiss publicou sua evidência experimental confirmando o trabalho de Chargaff e demonstrando a ausência de proteínas no princípio transformador de Avery. Além disso, o campo da genética bacteriana estava rapidamente se estabelecendo, e os biólogos estavam mais inclinados a pensar na hereditariedade nos mesmos termos para bactérias e organismos superiores., Depois que Hershey e Chase usaram isótopos radioativos para mostrar que era principalmente DNA, em vez de proteína, que entrou bactérias após a infecção com bacteriofagem, logo foi amplamente aceito que o DNA era o material. Apesar dos resultados experimentais muito menos precisos (eles encontraram uma quantidade não insignificante de proteína entrando nas células, bem como DNA), o experimento Hershey-Chase não foi sujeito ao mesmo grau de desafio., Sua influência foi impulsionada pela crescente rede do grupo FAG e, no ano seguinte, pela publicidade em torno da estrutura de DNA proposta por Watson e Crick (Watson também era um membro do grupo FAG). No entanto, apenas em retrospectiva, ambas as experiências provaram definitivamente que o ADN é o material genético.