8.7 Câncer de Próstata

Os efeitos da selecionado bioflavonóides, incluindo apigenin foram comparados sobre a proliferação de andrógeno-independente humanos câncer de próstata PC-3 células, o show completo retardo do crescimento após apigenin exposição . Foram também estudados os efeitos dos bioflavonóides sobre a actividade e o conteúdo de fosfotirosina da proteína oncogénica orientada para a proteína cinase FA (PDPK FA) nas células do carcinoma da próstata humana., Tratamento a longo prazo de células de carcinoma da próstata humana com baixas concentrações de quercetina, apigenina e kaempferol induziram potentemente a desphosforilação da tirosina e, concomitantemente, o AF oncogénico pdpk inactivado de uma forma dependente da concentração .a apigenina tem a capacidade de reduzir significativamente o número de células e induzir apoptose nas células PWR-1E, LNCaP, PC-3 e DU145 . As células PC-3 e DU145 eram menos susceptíveis à apoptose induzida pela apigenina do que as células LNCaP e PWR-1E. A indução da apoptose pela apigenina é dependente da caspase., A apigenina gera espécies reactivas de oxigénio, causa perda da expressão Bcl-2 mitocondrial, aumenta a permeabilidade mitocondrial, causa libertação do citocromo c e induz a clivagem da caspase 3, 7, 8 e 9 e a clivagem concomitante do inibidor da proteína da apoptose, cIAP-2. A sobre-expressão de Bcl-2 nas células B10 do LNCaP reduz os efeitos apoptóticos da apigenina. Um estudo demonstrou correlação entre a actividade da caseína cinase (CK) 2 e certas propriedades de crescimento das células cancerígenas da próstata ., A exposição à apigenina levou à inibição da actividade da CK2 tanto nas células Lencap sensíveis às hormonas como nas células PC-3 resistentes às hormonas, mas apenas as células Lencap sensíveis às hormonas responderam com apoptose. Estes estudos sugerem que uma elevada actividade CK2 não é essencial para o crescimento ou protecção contra a apoptose nas células do cancro da próstata hormono-refractário.avaliámos os efeitos inibidores do crescimento da apigenina nas células epiteliais normais da próstata humana (NHPE), nas células epiteliais PZ-HPV-7 da próstata humana normal transformadas viralmente e nas células CA-HPV-10 do adenocarcinoma da próstata humana ., O tratamento com apigenina para NHPE e PZ-HPV-7 resultou em Respostas inibitórias de crescimento quase idênticas de baixa magnitude, enquanto que foi observada uma diminuição significativa na viabilidade celular nas células CA-HPV-10. Além disso, relatamos que a apigenina inibe o crescimento do carcinoma da próstata humana androgênico sensível às células LNCaP e descreveu a base molecular para esta observação. A inibição do crescimento celular alcançada pelo tratamento com apigenina resultou numa diminuição significativa na expressão da proteína AR, juntamente com uma diminuição nas formas intracelulares e secretadas de APS ., O tratamento com apigenina das células LNCaP resultou numa paragem G1 na progressão do ciclo celular, a qual foi associada a uma diminuição acentuada na expressão proteica do cyclin D1, D2 e e do seu parceiro activador cdk2, 4 e 6 com indução concomitante de WAF1/p21 e KIP1/p27. A indução de WAF1 / p21 parece ser transcripcionalmente regulada e é dependente de p53. Além disso, a apigenina inibiu a hiperfosforilação da proteína pRb nestas células., Em seguida, estudamos os efeitos inibitórios mediados pela apigenina no carcinoma da próstata humana andrógeno-refractário células DU145 que têm mutações no gene supressor do tumor p53 e pRb. A exposição das células DU145 à apigenina resultou numa inibição do crescimento dependente da dose e do tempo, formação de colónias e paragem de fase G1 do ciclo celular . A exposição à apigenina também resultou na alteração da razão Bax / Bcl2 a favor da apoptose, que foi associada à libertação do citocromo c e à indução do factor-1 activador da protease apoptótica (Apaf-1)., Este efeito resultou num aumento significativo dos fragmentos clivados da caspase-9, -3 e poli (ADP-ribose) polimerase (PARP). A exposição à apigenina também resultou na modulação descendente da expressão constitutiva da NFkB/p65 e da NFkB/p50 na fração nuclear que correlacionou com um aumento na expressão da IkBa no citosol. Em outro estudo examinamos se a apigenina foi eficaz na inibição da expressão do NFkB, um gene que regula a sobrevivência de várias células e genes anti-apoptóticos., A exposição das células PC-3 à apigenina inibiu a ligação do ADN e reduziu os níveis nucleares das subunidades p65 e p50 da NFkB com uma diminuição concomitante na degradação do IkBa, fosforilação do IkBa e actividade da IkKa kinase . Além disso, a exposição à apigenina inibiu a activação induzida pelo TNF-α Do NFkB através da via IkBa, sensibilizando assim as células para a apoptose induzida pelo TNF-α., A inibição da ativação do NFkB correlacionada com uma diminuição da expressão do NFkB dependente do gene repórter e suprimida a expressão do NFkB-genes, especificamente, Bcl2, cyclin D1, ciclooxigenase-2, a matriz de metaloproteinase 9, óxido nítrico sintase-2, e VEGF. Além disso, investigamos os efeitos in vivo inibidores do crescimento da apigenina no carcinoma da próstata humana andrógeno 22rv1 xenografos tumorais implantados por via subcutânea em ratinhos atímicos machos nus ., A alimentação com apigenina resultou na inibição dose-dependente do crescimento tumoral, que foi associada ao aumento da acumulação de IGFBP-3 humano no soro do Ratinho. O consumo de apigenina por estes ratinhos também resultou na diminuição simultânea dos níveis séricos de IGF – 1 e na indução de apoptose nos xenografts tumorais, evidência favorável ao conceito de que os efeitos inibitórios do crescimento da apigenina envolvem a modulação da sinalização do eixo IGF no câncer de próstata. Estudos adicionais com intervenção farmacológica da apigenina demonstraram um efeito inibidor directo do crescimento nos tumores da próstata humana implantados em ratinhos atímicos nus., A alimentação Oral de apigenin resultou em dose-dependentes: 1) aumento na expressão da proteína de WAF1/p21, KIP1/p27, INK4a/p16, e INK4c/p18; 2) para baixo-a modulação da expressão de proteínas de cyclins D1, D2, e, e, e cyclin-cinases dependentes (cdk), cdk2, cdk4 e cdk6; 3) redução em retinoblastoma fosforilação em serina 780; 4) aumento da vinculação de cyclin D1 direção WAF1/p21 e KIP1/p27; e 5) diminuição da ligação de cyclin E em direção a cdk2 em ambos os tipos de tumores ., Os estudos com apigenina nas células LNCaP e PC – 3 demonstraram paragem de fase G0-G1, diminuição da proteína total do retinoblastoma (Rb) e sua fosforilação no Ser780 e Ser807/811 de forma dose – e dependente do tempo. O tratamento com apigenina causou um aumento da fosforilação de ERK1/2 e JNK1/2 e esta activação mantida resultou numa diminuição da fosforilação de ELK-1 e da expressão de c-FOS, inibindo assim a sobrevivência celular. Curiosamente, a apigenina causou uma redução acentuada no ciclin D1, D2 e E e seus parceiros regulatórios cdk 2, 4 e 6, operativo na fase G0–G1 do ciclo celular., Isto foi acompanhado por uma perda de fosforilação da ARN polimerase II, sugerindo a eficácia da apigenina na inibição da transcrição destas proteínas . Em outro estudo utilizando Transgênicos Adenocarcinoma de Mouse da Próstata (TRAMP) do modelo, que demonstrou que a administração oral de apigenin em doses de 20 e 50 µg/rato/d, 6 dias por semana, durante 20 semanas, diminuiu significativamente tumor volumes da próstata, bem como abolir completamente distante-site de metástases para linfonodos, pulmões e fígado ., A administração de apigenina resultou no aumento dos níveis de e-cadherina e diminuição dos níveis de β-catenina nuclear, C-Myc e cyclin D1 nos prostatos dorso-laterais de ratos TRAMP. Estes estudos indicam que a apigenina é eficaz na supressão da carcinogénese da próstata num modelo in vivo, pelo menos em parte, bloqueando a sinalização Da β-catenina., Além disso, demonstrámos que a apigenina em doses diferentes resultou na geração ROS, que foi acompanhada por uma rápida depleção de glutationa, ruptura do potencial da membrana mitocondrial, libertação citosólica do citocromo c e apoptose nas células do cancro da próstata humano 22Rv1 . Houve acumulação de uma fracção p53 para as mitocôndrias, que foi rápida e ocorreu entre 1 e 3 horas após o tratamento com apigenina. In vivo, estudos de xenograft 22Rv1 confirmaram que a administração de apigenina resultou na indução da apoptose mediada pela p53 em tumores 22Rv1., Estes resultados indicaram que a apoptose induzida pela apigenina nas células 22Rv1 é iniciada por uma ruptura dependente da ROS do potencial da membrana mitocondrial através de vias p53 transcritoriais e independentes.o(s) mecanismo (s) de acção da apigenina na Via sinalizadora IGF/IGF-IR (proteína do receptor 1 do factor de crescimento tipo insulina) do cancro da próstata humano as células DU145 reduziram acentuadamente a proliferação celular estimulada IGF-I e induziram a apoptose . Este efeito da apigenina pode ser parcialmente devido à redução da autofosforilação de IGF-IR., A inibição da P-Akt pela apigenina resultou numa diminuição da fosforilação da GSK-3β. Num outro estudo utilizando células PC-3 do cancro da próstata humana, demonstrámos ainda que a desphoforilação da Akt mediada pela apigenina resultou na inibição da sua actividade cinase, que foi confirmada pela redução da fosforilação das proteínas pró-apoptóticas más e da glicogénio sintase cinase-3, alvos essenciais a jusante da Akt . Estes resultados sugerem que a inactivação da Akt e a desphosphorilação do mau é um acontecimento crítico, pelo menos em parte, na diminuição da sobrevivência celular e da apoptose induzida pela apigenina., Um relatório em 2008 sugeriu que a hipoxia induziu um aumento dependente do tempo do nível de proteína subunidade HIF-1α nas células PC3-M, que estavam a diminuir acentuadamente a expressão HIF-1α após o tratamento com apigenina, tanto em condições normóxicas como hipóxicas . A apigenina impediu a activação do HIF-1 e do seu gene-alvo a jusante VEGF.