os Animais têm sido utilizados na produção industrializada de humanos vacinas desde vacina fazendas foram estabelecidas para a colheita, a varíola bovina vírus de bezerros no final de 1800. A partir desse ponto, até a primeira metade do século 20, a maioria das vacinas continuará a ser desenvolvido com o uso de animais, seja através do crescimento de patógenos de animais vivos ou usando células de animais.apesar de muitas vacinas e produtos anti-toxínicos terem sido desenvolvidos com sucesso desta forma, a utilização de animais no desenvolvimento de vacinas – particularmente Animais vivos – não é o ideal., Os animais de investigação são dispendiosos e exigem um acompanhamento exaustivo, tanto para manter a sua saúde como para assegurar a viabilidade contínua da investigação. Eles podem estar carregando outras bactérias ou vírus que poderiam contaminar a eventual vacina, como com as vacinas da pólio a partir de meados do século 20 que foram feitas com células de macacos e eventualmente encontrados para conter um vírus de macaco chamado SV40, ou vírus símio 40. (Felizmente, o vírus não foi encontrado para ser prejudicial aos seres humanos.) Além disso, alguns patógenos, como o vírus da varicela, simplesmente não crescem bem nas células animais., mesmo quando o desenvolvimento da vacina é feito utilizando produtos de origem animal e não Animais vivos – tais como o cultivo de vírus da vacina contra a gripe em ovos de galinha – o desenvolvimento pode ser prejudicado ou mesmo interrompido se a disponibilidade dos produtos de origem animal diminuir. Se uma doença atingisse as galinhas produtoras de ovos, por exemplo, elas poderiam produzir poucos ovos para serem utilizados no desenvolvimento de vacinas contra a gripe sazonal, levando a uma grave escassez de vacinas. (É um equívoco comum de que as vacinas contra a gripe poderiam ser produzidas mais rapidamente se cultivadas em culturas celulares em comparação com o uso de ovos de galinha embrionados., Na verdade, o cultivo dos vírus da vacina em culturas celulares levaria aproximadamente a mesma quantidade de tempo. No entanto, as culturas celulares não têm os mesmos problemas potenciais de disponibilidade que os ovos de galinha.)
Por estas e outras razões, o uso de técnicas de cultura de células para produzir vírus da vacina em estirpes de células humanas é um avanço significativo no desenvolvimento da vacina.as culturas celulares envolvem células em crescimento num recipiente de cultura., Uma cultura primária de células consiste em células retiradas diretamente do tecido vivo e nunca subcultivadas, e pode conter vários tipos de células, tais como fibroblastos, epiteliais e células endoteliais.
uma estirpe de célula é uma cultura de células que contém apenas um tipo de célula em que as células são normais e têm uma capacidade finita de replicar. As estirpes celulares podem ser feitas tomando subculturas de uma cultura primária original até que apenas um tipo permaneça., Culturas primárias podem ser manipuladas de muitas maneiras diferentes, a fim de isolar um único tipo de célula; girando a cultura em uma centrifugadora pode separar grandes células de pequenas, por exemplo. Uma linha celular imortalizada é uma cultura celular de um único tipo de célula que pode se reproduzir indefinidamente. Normalmente, as células estão sujeitas ao limite de Hayflick, uma regra chamada de biólogo celular Leonard Hayflick, PhD. Hayflick determinou que uma população de células humanas normais reproduzirá apenas um número finito de vezes antes de deixar de se reproduzir., No entanto, algumas células em cultura sofreram uma mutação, ou foram manipuladas no laboratório, de modo que se reproduzem indefinidamente. Um exemplo de uma linha celular imortalizada é a chamada linha celular HeLa, iniciada a partir de células cancerosas cervicais tomadas na década de 1950 de uma mulher chamada Henrietta Lacks. As linhas celulares não são utilizadas para produzir o vírus da vacina.os investigadores podem desenvolver agentes patogénicos humanos como os vírus nas estirpes celulares para os atenuar, ou seja, para os enfraquecer., Uma maneira de os vírus serem adaptados para uso em vacinas é alterá-los para que eles não sejam mais capazes de crescer bem no corpo humano. Isto pode ser feito, por exemplo, aumentando repetidamente o vírus numa estirpe celular humana mantida a uma temperatura inferior à temperatura corporal normal. A fim de continuar a replicar, o vírus Adapta-se para se tornar melhor em crescimento à temperatura mais baixa, perdendo assim a sua capacidade original de crescer bem e causar doenças a temperaturas normais do corpo., Mais tarde, quando é usado numa vacina e injectado num corpo humano vivo a uma temperatura normal, ainda provoca uma resposta imunitária, mas não se consegue replicar o suficiente para causar doença.
Vacinas Desenvolvidas Utilizando Célula Humana Cepas
A primeira vacina licenciada feito com o uso de uma célula humana estirpe foi o adenovírus vacina utilizada por militares no final da década de 1960. Mais tarde, outras vacinas foram desenvolvidas linhagens de células humanas, nomeadamente a vacina contra a rubéola desenvolvido por Stanley Plotkin, MD, do Wistar Institute, na Filadélfia.,em 1941, o oftalmologista australiano Norman Gregg percebeu pela primeira vez que cataratas congênitas em bebês eram o resultado de suas mães serem infectadas com rubéola durante a gravidez. Junto com cataratas, foi eventualmente determinado que a síndrome congênita da rubéola (CRS) também pode causar surdez, doença cardíaca, encefalite, atraso mental e pneumonia, entre muitas outras condições., No auge de uma epidemia de rubéola que começou na Europa e se espalhou para os Estados Unidos em meados da década de 1960, Plotkin calculou que 1% de todos os nascimentos no Philadelphia General Hospital foram afetados pela síndrome da rubéola congênita. Em alguns casos, mulheres infectadas com rubéola durante a gravidez interromperam a gravidez devido aos riscos graves da src.após um aborto, o feto foi enviado a Plotkin no laboratório que ele tinha dedicado à pesquisa da rubéola. Testando o rim do feto, Plotkin encontrou e isolou o vírus da rubéola., Separadamente, Leonard Hayflick (também trabalhando no Instituto Wistar na época) desenvolveu uma estirpe celular chamada WI-38 usando células pulmonares de um feto abortado. Hayflick descobriu que muitos vírus, incluindo rubéola, cresceram bem no WI-38, e ele mostrou que ele provou ser livre de contaminantes e seguro de usar para vacinas humanas.
Plotkin cultivou o vírus da rubéola que tinha isolado em células WI-38 mantidas a 86 ° F (30 ° C), de modo que acabou por crescer muito mal à temperatura corporal normal. (He chose the low temperature approach following previous experiences with atenuing poliovirus.,) Depois que o vírus tinha sido cultivado através das células 25 vezes na temperatura mais baixa, ele não era mais capaz de replicar o suficiente para causar doença em uma pessoa viva, mas ainda era capaz de provocar uma resposta imunitária protetora. A vacina contra a rubéola desenvolvida com WI-38 ainda é utilizada em grande parte do mundo de hoje como parte da vacina combinada MMR (sarampo, papeira e rubéola).
questões éticas com culturas de células humanas
embora tenha sido usado nos Estados Unidos Por mais de 30 anos, a vacina contra a rubéola de Plotkin foi inicialmente ignorada pelos EUA., Food and Drug Administration in favor of rubella vaccines developed using duck embryo cells and dog kidney cells. No final da década de 1960, havia preocupação no País de que uma vacina desenvolvida usando células humanas poderia estar contaminada com outros patógenos, embora esta preocupação não fosse apoiada por evidências documentadas. Isto é interessante à luz da descoberta, no início da década, de que as vacinas contra a poliomielite desenvolvidas com células primárias de rim de macaco estavam contaminadas com vírus símios: esta foi uma das razões pelas quais os pesquisadores começaram a usar a estirpe normal de células humanas WI-38 em primeiro lugar., De acordo com Hayflick, no entanto, a principal razão para o uso do WI-38 foi o fato de que ele poderia ser armazenado em nitrogênio líquido, reconstituído e testado cuidadosamente antes da utilização para vírus contaminantes. (Nunca foi encontrado nenhum em WI-38. As células primárias do rim do macaco não podiam ser congeladas e depois reconstituídas para testes, pois isso violaria o conceito de células primárias–originalmente a única classe de células permitida pela FDA para produzir vacinas de vírus humanos.,após os testes, A vacina de Plotkin foi licenciada pela primeira vez na Europa em 1970 e foi amplamente utilizada lá com um perfil de segurança forte e elevada eficácia. À luz desses dados, e dos maiores perfis de efeitos secundários com as outras duas vacinas contra a rubéola, foi licenciada nos Estados Unidos em 1979 e substituiu o componente da vacina contra a rubéola que tinha sido anteriormente utilizado para a vacina combinada MMR (sarampo, papeira, rubéola) da Merck. Em 2005, o CDC declarou a rubéola eliminada dos Estados Unidos, embora a ameaça de casos importados permanece., A Organização Mundial de Saúde declarou as Américas livres da rubéola em 2015.grupos que se opõem ao aborto levantaram questões éticas sobre a vacina contra a rubéola de Plotkin (e outras vacinas desenvolvidas com estirpes semelhantes de células humanas) ao longo dos anos.devido à sua posição sobre o aborto, alguns membros da Igreja Católica pediram sua orientação moral sobre o uso de vacinas desenvolvidas usando estirpes celulares iniciadas com células fetais humanas. Isto inclui a vacina contra a rubéola, bem como contra a varicela e a hepatite A, e algumas outras vacinas., A posição oficial de acordo com o Centro Nacional de Bioética Católica é que os indivíduos devem, quando possível, usar vacinas não desenvolvidas com o uso dessas estirpes de células humanas. No entanto, no caso em que a única vacina disponível contra uma determinada doença foi desenvolvida usando esta abordagem, o NCBC observa:
é moralmente livre de usar a vacina, independentemente da sua associação histórica com o aborto. A razão é que o risco para a saúde pública, caso se opte por não vacinar, supera a legítima preocupação com as origens da vacina., Isto é especialmente importante para os pais, que têm a obrigação moral de proteger a vida e a saúde dos seus filhos e dos que os rodeiam.
The NCBC does note that Catholics should incentive pharmaceutical companies to develop future vaccines without the use of these cell strains., Para responder a preocupações sobre células fetais, permanecendo como ingredientes reais das vacinas, no entanto, eles especificamente observação de que células fetais eram usados apenas para começar a célula cepas que foram utilizados na preparação de vacina de vírus:
Descendente células são o meio em que estas vacinas são preparadas. As linhas celulares em consideração foram iniciadas usando células retiradas de um ou mais fetos abortados há quase 40 anos. Desde então, as linhas celulares cresceram de forma independente. É importante notar que as células descendentes não são as células da criança abortada., Eles nunca, eles próprios, formaram parte do corpo da vítima.
no total, apenas dois fetos, ambos obtidos a partir de abortos feitos por escolha materna, deram origem às estirpes de células humanas utilizadas no desenvolvimento da vacina. Nem o aborto foi realizado para efeitos de desenvolvimento de vacinas.foram utilizadas duas estirpes principais de células humanas para desenvolver vacinas actualmente disponíveis, em cada caso com as células fetais originais em questão obtidas nos anos 60., A estirpe de células WI-38 foi desenvolvida em 1962 nos Estados Unidos, e a estirpe de células MRC-5 (também iniciada com células pulmonares fetais) foi desenvolvida, usando a tecnologia de Hayflick, em 1970 no centro de Pesquisa Médica no Reino Unido. Note-se que os métodos de Hayflick envolveram o estabelecimento de um enorme banco de células WI-38 e MRC-5 que, embora não sejam capazes de replicar infinitamente como linhas celulares imortais, irão servir as necessidades de produção de vacinas durante várias décadas no futuro.as vacinas abaixo foram desenvolvidas utilizando as estirpes celulares WI-38 ou MRC-5.,os investigadores estimaram que as vacinas produzidas em WI-38 e seus derivados evitaram cerca de 11 milhões de mortes e evitaram (ou trataram, no exemplo da raiva) 4,5 mil milhões de casos de doença.várias vacinas actualmente disponíveis nos Estados Unidos foram desenvolvidas utilizando estirpes de células animais, principalmente usando células de macacos verdes africanos. Estas incluem vacinas contra encefalite japonesa, rotavírus, poliomielite e varíola. Destes, apenas vacinas contra rotavírus e poliomielite são administradas por rotina.,
fontes e Leitura Adicional
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