cotejo cruzado
el procedimiento de cotejo cruzado determina si la sangre del donante es compatible (o incompatible) con la sangre del receptor. Una variante de esta prueba es la prueba de compatibilidad cruzada yegua-potro o yegua-semental o la prueba de incompatibilidad.
en relación con las transfusiones de sangre, se debe realizar una comparación cruzada en las siguientes situaciones:
- están presentes anticuerpos patógenos naturales contra antígenos de grupos sanguíneos extraños. Esto ocurre en el gato., En esta especie, se debe realizar una comparación cruzada en la primera y en cada transfusión, a menos que se conozcan los tipos de sangre tanto del donante como del receptor. En razas de gatos en las que hay un bajo porcentaje de gatos de tipo B (por ejemplo, siameses, DSH o DLH en los EE.UU.), la transfusión de sangre de un donante no cruzado o sin tipo puede realizarse de forma relativamente segura. Sin embargo, todavía hay una (aunque pequeña) posibilidad de una reacción de transfusión importante y este procedimiento no se recomienda.
- sensibilización de un animal a antígenos de glóbulos rojos extraños, en una especie sin anticuerpos naturales., Esta es la situación en el perro y el caballo, lo que resulta en la producción de anticuerpos adquiridos. En estas especies, no es necesario realizar una comparación cruzada en la primera transfusión que recibe el animal (siempre que pueda estar seguro de que esta es la primera transfusión), sino que debe realizarse en transfusiones posteriores (si el intervalo entre la primera y las transfusiones posteriores es más de 5 días).,
la comparación cruzada detectará incompatibilidades entre el donante y el receptor que no serán evidentes en el grupo sanguíneo (ya que el grupo sanguíneo no está disponible contra todos los grupos sanguíneos, solo los principales). Además, el procedimiento de cotejo cruzado no detectará anticuerpos de bajo título y, por lo tanto, no evitará las reacciones hemolíticas de transfusión de tipo retardado (para obtener más información, consulte reacciones adversas).
Hay dos tipos de comparación cruzada:
- comparación cruzada mayor: Esta es la comparación cruzada más importante, que compara los eritrocitos del donante con el suero del receptor (p. e., está comprobando si hay anticuerpos preformados (adquiridos o de origen natural) en el suero del receptor contra los eritrocitos del donante. Para la comparación cruzada principal, se necesitan glóbulos rojos del donante (esto puede ser sangre completa de un animal donante o glóbulos rojos empaquetados) en EDTA o citrato y suero del receptor (tubo no anticoagulante).
- comparación cruzada menor: esto compara el suero del donante con los eritrocitos del receptor y comprueba si hay anticuerpos preformados en el suero del donante que podrían hemolizar los glóbulos rojos del receptor., Esta coincidencia cruzada es menos importante, ya que generalmente el suero del donante se diluye marcadamente después de la transfusión y es poco probable que produzca una reacción transfusional significativa. Este tipo de coincidencia cruzada podría ser importante si se transfunde a pacientes pequeños, en los que la hemodilución es menos probable que ocurra. En el procedimiento de coincidencia cruzada, los eritrocitos lavados se incuban con suero. Para caballos, rumiantes y camélidos, se agrega una fuente de complemento (para hemolizar los eritrocitos), ya que los anticuerpos en caballos suelen ser hemolisinas que requieren una fuente de complemento para su acción hemolítica.,
- para la comparación cruzada mayor: los eritrocitos del donante se lavan e incuban con suero del receptor.
- Para la comparación cruzada menor: el suero del donante se incuba con eritrocitos del receptor lavados.
la mezcla de eritrocitos y suero se observa visualmente para la hemólisis (especialmente en el caballo), y microscópicamente para la aglutinación. Cualquier evidencia de aglutinación o hemólisis indica una compatibilidad cruzada incompatible. También hay kits comerciales disponibles para detectar incompatibilidades de grupos sanguíneos., Muchos de estos se basan en geles, a los que se añaden glóbulos rojos del donante y suero del receptor (comparación cruzada mayor) o suero del donante y glóbulos rojos del receptor (comparación cruzada menor). Las reacciones positivas (coincidencias cruzadas incompatibles) producen una línea de glóbulos rojos en el medio del gel, mientras que en una reacción negativa (compatible), los glóbulos rojos sedimentan al fondo del tubo., Los estudios han demostrado que estos métodos rápidos basados en gel no son tan sensibles como los ensayos de laboratorio que consumen más tiempo y evalúan las aglutininas microscópicamente (o hemolisinas visualmente para algunas especies) y los resultados no siempre se correlacionan entre los ensayos (Guzman et al 2016).
cuando hay una fuerte reacción incompatible en la comparación cruzada mayor, la sangre del donante no debe ser transfundida bajo ninguna circunstancia. Cuando hay una reacción incompatible en la coincidencia cruzada menor, la transfusión puede continuar., Sin embargo, si es probable que el suero donado contribuya sustancialmente al volumen plasmático del receptor, el suero debe extraerse de la sangre total del donante. Las células empaquetadas (lavadas o sin lavar) deben reconstituirse en solución salina isotónica estéril antes de la perfusión. Tenga en cuenta que si se administra sangre incompatible con la compatibilidad cruzada a caballos adultos en la primera transfusión, los glóbulos rojos transfundidos tendrán una supervivencia marcadamente reducida y se pueden observar reacciones no hemolíticas leves (Tomlinson et al 2015). Como consecuencia, los investigadores recomiendan el cruce de caballos en la primera transfusión.,
más información está disponible en las pruebas de compatibilidad cruzada ofrecidas por el Centro de diagnóstico de Salud Animal de la Universidad de Cornell.
prueba de incompatibilidad yegua-potro o yegua-semental
la prueba de incompatibilidad yegua-potro o yegua-semental es un procedimiento de coincidencia cruzada que busca la incompatibilidad entre la yegua y el potro o la yegua y el semental. Específicamente, la prueba compara si hay anticuerpos en el suero de yegua (o calostro) con los eritrocitos de potro o semental., La compatibilidad cruzada de incompatibilidad yegua-potro es una prueba para la confirmación o prevención de la isoeritrólisis neonatal.
La isoeritrolisis Neonatal (NI) es una anemia hemolítica que se produce en potros (que heredan antígenos del grupo sanguíneo de su padre) nacidos de yeguas de un tipo sanguíneo diferente al semental con el que se aparearon., La yegua se sensibiliza al antígeno del grupo sanguíneo del semental a través de:
- embarazos previos (la situación más común)
- transfusiones previas de sangre o plasma
- vacunación con productos que contienen antígenos de eritrocitos equinos
la sensibilización se produce durante el embarazo debido a un fenómeno llamado sangrado retroplacentario, en el que la sangre del potro entra en contacto con la circulación de la yegua durante las últimas semanas de embarazo. Puede ocurrir naturalmente antes si hay alguna patología placentaria., Por lo tanto, el NI ocurre generalmente en yeguas multiparas y solo después de que el potro haya ingerido calostro. Los tipos sanguíneos más comunes en el caballo que producen NI son los antígenos Aa y Qa, aunque se han notificado NI a otros antígenos (incluyendo Pa y Ai). Cuando el potro ingiere calostro que contiene anticuerpos de la yegua contra los antígenos de los glóbulos rojos del Padre, El Potro (si el grupo sanguíneo del Padre ha sido heredado) sufre una anemia hemolítica, que puede ser grave y resultar en mortalidad neonatal., La mayoría de los signos de NI ocurren dentro de 24-36 horas; debilidad, hemoglobinuria y hemoglobinemia se pueden ver en casos graves.
Además, todos los caballos carecen de un antígeno que es exclusivo de los glóbulos rojos de burro (el llamado factor burro). Por lo tanto, los embarazos de mulas están en riesgo de iniciar NI (MacLeay, 2001, Boyle et al., 2005).
prueba de incompatibilidad entre yegua y potro
para determinar si se ha producido NI en un potro que ya ha nacido, se puede realizar una comparación cruzada entre la yegua y el potro. Esto requiere la presentación de eritrocitos del potro (sangre EDTA) y suero separado de la yegua., En la Universidad de Cornell, realizamos una prueba de incompatibilidad yegua-potro y buscamos tanto aglutinación (evaluación microscópica) como reacciones hemolíticas (esta última mediante la adición de una fuente de complemento para lisar los glóbulos rojos).
alternativamente, para diagnosticar NI en un potro, se puede hacer una prueba directa de Coombs (en busca de anticuerpos o complemento unido a los glóbulos rojos del potro) en la sangre del potro (esto requiere un tubo de EDTA del potro). Sin embargo, estas pruebas generalmente son realizadas por laboratorios de referencia y los resultados solo pueden estar disponibles después de varios días.,
hay un kit disponible, llamado prueba de aglutinación de potro de ictericia (JFA), que se puede realizar» stallside » (si tiene una centrífuga). Esta prueba evalúa la aglutinación entre calostro o suero de yegua y sangre de potro. El calostro o suero se diluye en serie y se mezcla con sangre de potro en tubos de ensayo. Los tubos se centrifugan y el botón se observa para la aglutinación. Si la aglutinación está presente, el botón no se dispersa cuando el tubo se movió., Una reacción positiva a un título de > 1: 16 es indicativa de una incompatibilidad (a títulos más bajos, pueden ocurrir reacciones falsas positivas) e indica que el calostro debe ser retenido del potro. Esta es una prueba útil para determinar si una yegua, que ha tenido previamente un potro con NI y ha sido apareada con el mismo semental que produjo el potro de NI u otro semental de tipo sanguíneo desconocido, tiene anticuerpos contra el potro actual., Sin embargo, la prueba no busca hemólisis y es menos sensible que el procedimiento rutinario de coincidencia cruzada (que evalúa la aglutinación microscópica y la hemólisis)., serum alloantibody bound to foal RBCs
Mare: venous blood (non-anticoagulant)
Mare: colostrum/serum
aglutinación
prueba de incompatibilidad de yegua-semental
la isoeritrolisis neonatal puede prevenirse mediante la prueba de una yegua susceptible antes del parto (prueba de incompatibilidad de yegua-semental) y la retención de calostro durante 24 a 48 horas (por Amordazar al potro y alimentar una fuente alternativa de calostro)., Idealmente, la yegua debe compararse con el semental (glóbulos rojos de Semental y suero de yegua), especialmente en las últimas 1-3 semanas de embarazo, cuando es probable que se produzca la exposición a los eritrocitos del potro (si hay una incompatibilidad, la yegua tendrá una respuesta anamnésica al antígeno, lo que resulta en un título de anticuerpos alto en este momento). Algunos autores recomiendan repetir el cotejo cruzado cada dos semanas en el último mes de embarazo para buscar un título ascendente (a menudo aumenta de < 1:4 a >1:256 en las últimas cuatro semanas antes del potro)., Un título ascendente indica una alta probabilidad de NI y revela la necesidad de retener calostro del potro.
alternativamente, la prueba de aglutinación del potro de ictericia se puede usar en el parto y el calostro se puede retener. Tenga en cuenta que una sola coincidencia cruzada entre una yegua y un semental puede no revelar una incompatibilidad si la yegua se analiza antes o al principio del embarazo (debido a los bajos títulos de anticuerpos que pueden no producir una reacción incompatible)., Dado que la prueba de incompatibilidad yegua-semental requiere glóbulos rojos del semental (sangre EDTA), que puede ser difícil de obtener, un enfoque alternativo para determinar si la yegua es probable que desarrolle anticuerpos contra los glóbulos rojos del potro (con el tipo de sangre del Padre), el suero de la yegua se puede examinar contra un panel de antígenos de glóbulos rojos para la presencia de anticuerpos, que se realiza en centros específicos (ver enlaces relacionados)., Una vez más, esta prueba debe hacerse lo más cerca posible de la cría, cuando es probable que la yegua desarrolle una respuesta anamnésica (una respuesta mejorada Después de la reexposición al antígeno primario de los glóbulos rojos) a partir de un tipo de glóbulos rojos incompatible en la sangre del potro (ver arriba). Cuando una yegua ha tenido un potro de NI y se aparea de nuevo con el mismo semental, hay un 50% de probabilidad de que el próximo potro esté en riesgo de NI (si hereda el tipo de glóbulos rojos del Padre). En este caso, siempre es más seguro retener el calostro del potro., Si la yegua se aparea con un nuevo semental, la tipificación tanto de la yegua como del semental es ideal para determinar si tienen tipos sanguíneos incompatibles. De hecho, una vez que una yegua ha tenido un potro con NI, siempre es bueno determinar el tipo de sangre de la yegua y el posible antígeno ofensivo para que los apareamientos futuros puedan manejarse adecuadamente. La única ventaja que tiene una comparación cruzada contra el enfoque de título de anticuerpo específico es que puede detectar incompatibilidades de grupos sanguíneos contra antígenos que no están en un panel de detección., Sin embargo, existe un bajo riesgo de que se pase por alto un anticuerpo anti-RBC porque el suero se analiza contra los antígenos eritrocitarios ofensivos comunes y los informes de otros antígenos asociados con la IIN son raros. Ambas pruebas (cotejo cruzado y títulos de anticuerpos) tienen el potencial de pasar por alto niveles bajos de anticuerpos. Es por eso que es esencial probar la yegua lo más cerca posible Del Potro.