correspondance croisée
la procédure de correspondance croisée détermine si le sang du donneur est compatible (ou incompatible) avec le sang du receveur. Une variante de ce test est le test de croisement jument-poulain ou jument-étalon ou d’incompatibilité.
en ce qui concerne les transfusions sanguines, une correspondance croisée doit être effectuée dans les situations suivantes:
- des anticorps pathogènes naturels dirigés contre des antigènes de groupes sanguins étrangers sont présents. Cela se produit dans le chat., Chez cette espèce, une correspondance croisée doit être effectuée à la première et à chaque transfusion, à moins que les groupes sanguins du donneur et du receveur ne soient connus. Dans les races de chats où il y a un faible pourcentage de chats de type B (par exemple Siamois, DSH ou DLH aux États-Unis), la transfusion de sang d’un donneur non apparié ou non typé peut être effectuée relativement en toute sécurité. Cependant, il y a encore une chance (quoique faible) d’une réaction transfusionnelle majeure et cette procédure n’est pas recommandée.
- sensibilisation d’un animal aux antigènes érythrocytaires étrangers, chez une espèce dépourvue d’anticorps naturels., C’est la situation chez le chien et le cheval, entraînant la production d’anticorps acquis. Chez ces espèces, une correspondance croisée n’a pas besoin d’être effectuée lors de la première transfusion que l’animal reçoit (tant que vous pouvez être sûr qu’il s’agit de la première transfusion), mais doit être effectuée lors de transfusions ultérieures (si l’intervalle entre la première et les transfusions ultérieures est supérieur à 5 jours).,
la correspondance croisée détectera les incompatibilités entre le donneur et le receveur qui ne seront pas évidentes lors du typage sanguin (car le typage sanguin n’est pas disponible pour tous les groupes sanguins, seulement les principaux). En outre, la procédure de correspondance croisée ne détectera pas les anticorps à faible titre et n’empêchera donc pas les réactions transfusionnelles hémolytiques de type retardé (pour plus d’informations, voir effets indésirables).
Il existe deux types de correspondances croisées:
- correspondance croisée majeure: il s’agit de la correspondance croisée la plus importante, comparant les érythrocytes du donneur au sérum du receveur (c.-à-d., vous recherchez des anticorps préformés (acquis ou naturels) dans le sérum du receveur contre les érythrocytes du donneur. Pour le crossmatch majeur, vous avez besoin de globules rouges du donneur (il peut s’agir de sang total d’un animal donneur ou de globules rouges emballés) dans de L’EDTA ou du citrate et du sérum du receveur (tube non anticoagulant).
- correspondance croisée mineure: ceci compare le sérum du donneur aux érythrocytes du receveur et vérifie la présence d’anticorps préformés dans le sérum du donneur qui pourraient hémolyser les globules rouges du receveur., Cette correspondance croisée est moins importante car généralement le sérum du donneur est nettement dilué après la transfusion et il est peu probable qu’il produise une réaction transfusionnelle significative. Ce type de correspondance croisée pourrait être important en cas de transfusion de petits patients, chez lesquels l’hémodilution est moins susceptible de se produire. Dans la procédure de correspondance croisée, les érythrocytes lavés sont incubés avec du sérum. Pour les chevaux, les ruminants et les camélidés, une source de complément (pour hémolyser les érythrocytes) est ajoutée, car les anticorps chez les chevaux sont généralement des hémolysines qui nécessitent une source de complément pour leur action hémolytique.,
- Pour la principale correspondance croisée: les érythrocytes du donneur sont lavés et incubés avec le sérum du receveur.
- Pour la correspondance croisée mineure: le sérum du donneur est incubé avec des érythrocytes du receveur lavés.
le mélange d’érythrocytes et de sérum est ensuite observé visuellement pour l’hémolyse (en particulier chez le cheval), et microscopiquement pour l’agglutination. Toute preuve d’agglutination ou d’hémolyse indique une correspondance croisée incompatible. Il existe également des kits commerciaux disponibles pour détecter les incompatibilités de groupe sanguin., Beaucoup d’entre eux sont basés sur des gels, auxquels les globules rouges du donneur et le sérum du receveur sont ajoutés (crossmatch majeur) ou le sérum du donneur et les globules rouges du receveur (Crossmatch mineur). Les réactions positives (croisements incompatibles) donnent une ligne de globules rouges au milieu du gel, tandis que dans une réaction négative (compatible), les globules rouges se déposent au fond du tube., Des études ont montré que ces méthodes rapides à base de gel ne sont pas aussi sensibles que des tests de laboratoire plus longs qui évaluent les agglutinines au microscope (ou les hémolysines visuellement pour certaines espèces) et que les résultats ne sont pas toujours corrélés entre les tests (Guzman et al 2016).
Lorsqu’il y a une forte réaction incompatible sur la correspondance croisée majeure, le sang du donneur ne doit en aucun cas être transfusé. Quand il y a une réaction incompatible sur la correspondance croisée mineure, la transfusion peut aller de l’avant., Toutefois, si le sérum donné est susceptible de contribuer substantiellement au volume plasmatique du receveur, le sérum doit être retiré du sang total du donneur. Les cellules emballées (lavées ou non lavées) doivent être reconstituées dans une solution saline isotonique stérile avant perfusion. Notez que si du sang incompatible avec les correspondances croisées est administré à des chevaux adultes lors de la première transfusion, les globules rouges transfusés auront une survie nettement raccourcie et de légères réactions non hémolytiques peuvent être observées (Tomlinson et al 2015). En conséquence, les chercheurs recommandent de croiser les chevaux lors de la première transfusion.,
de plus amples informations sont disponibles sur les tests de correspondance croisée proposés par le centre de Diagnostic de la santé animale de L’Université Cornell.
Test D’incompatibilité jument-poulain ou jument-étalon
le test d’incompatibilité jument-poulain ou jument-étalon est une procédure de correspondance croisée qui recherche l’incompatibilité entre la jument et le poulain ou la jument et l’étalon. Plus précisément, le test compare la présence d’anticorps dans le sérum de jument (ou le colostrum) contre les érythrocytes de poulain ou d’étalon., Le cross-match d’incompatibilité jument-poulain est un test de confirmation ou de prévention de l’isoérythrolyse néonatale.
l’isoérythrolyse néonatale (NI) est une anémie hémolytique qui survient chez les poulains (qui héritent des antigènes du groupe sanguin de leur père) nés de juments d’un groupe sanguin différent de l’étalon auquel ils ont été accouplés., La jument est sensibilisée à l’antigène du groupe sanguin de l’étalon par:
- grossesses antérieures (situation la plus courante)
- transfusions sanguines ou plasmatiques antérieures
- vaccination avec des produits contenant des antigènes érythrocytaires équins
La sensibilisation se produit pendant la grossesse en raison d’un phénomène appelé saignement rétroplacentaire, dans lequel le sang du poulain entre en contact avec la circulation de la jument au cours des dernières semaines de grossesse. Il peut naturellement se produire plus tôt s’il y a une pathologie placentaire., Par conséquent, le NI se produit généralement chez les juments multipares et seulement après que le poulain a ingéré du colostrum. Les groupes sanguins les plus courants chez le cheval qui produisent du NI sont les antigènes Aa et Qa, bien que le NI à d’autres antigènes (y compris Pa et Ua) ait été rapporté. Lorsque le poulain ingère du colostrum contenant des anticorps de la jument contre les antigènes des globules rouges du Père, le poulain (si le groupe sanguin du Père a été hérité) souffre d’une anémie hémolytique, qui peut être sévère et entraîner une mortalité néonatale., La plupart des signes de NI se produisent dans les 24-36 heures; la faiblesse, l’hémoglobinurie et l’hémoglobinémie peuvent être observées dans les cas graves.
de plus, tous les chevaux n’ont pas d’antigène propre aux globules rouges de l’Âne (appelé facteur de l’Âne). Ainsi, les grossesses muletières sont à risque d’initier NI (MacLeay, 2001, Boyle et al., 2005).
test D’incompatibilité entre la jument et le poulain
pour déterminer s’il y a eu NI chez un poulain déjà né, un croisement peut être effectué sur la jument et le poulain. Cela nécessite la soumission d’érythrocytes du poulain (sang EDTA) et de sérum séparé de la jument., À L’Université Cornell, nous effectuons un test d’incompatibilité jument-poulain et recherchons à la fois l’agglutination (évaluation microscopique) et les réactions hémolytiques (cette dernière via l’ajout d’une source de complément pour lyser les globules rouges).
alternativement, pour diagnostiquer le NI chez un poulain, un test de Coombs direct (recherche d’anticorps ou de complément lié aux globules rouges du poulain) peut être effectué sur le sang du poulain (cela nécessite un tube EDTA du poulain). Cependant, ces tests sont généralement effectués par des laboratoires de référence et les résultats ne peuvent être disponibles qu’après plusieurs jours.,
Il y a un kit disponible, appelé le test d’agglutination de poulain de jaunisse (JFA), qui peut être effectué « stallside” (si vous avez une centrifugeuse). Ce test évalue l’agglutination entre le colostrum ou le sérum de jument et le sang de poulain. Le Colostrum ou le sérum est dilué en série et mélangé avec du sang de poulain dans des tubes à essai. Les tubes sont centrifugés et le bouton est observé pour l’agglutination. Si l’agglutination est présente, le bouton ne se disperse pas lorsque le tube est feuilleté., Une réaction positive à un titre de > 1:16 indique une incompatibilité (à des titres inférieurs, des réactions faussement positives peuvent se produire) et indique que le colostrum doit être refusé au poulain. Ceci est un test utile pour déterminer si une jument, qui a déjà eu un poulain avec NI et a été accouplée au même étalon qui a produit le poulain NI ou un autre étalon de groupe sanguin inconnu, a des anticorps contre le poulain actuel., Cependant, le test ne recherche Pas d’hémolyse et est moins sensible que la procédure de correspondance croisée de routine (qui évalue l’agglutination microscopique et l’hémolyse)., serum alloantibody bound to foal RBCs
Mare: venous blood (non-anticoagulant)
Mare: colostrum/serum
Agglutination
test d’incompatibilité jument-étalon
l’isoérythrolyse néonatale peut potentiellement être évitée en testant une jument sensible avant la parturition (test d’incompatibilité jument-étalon) et en retenant le colostrum pendant 24 à 48 heures (en muselant le poulain et l’alimentation d’une source alternative de colostrum)., Idéalement, la jument doit être appariée avec l’étalon (globules rouges de l’étalon et sérum de la jument), en particulier au cours des 1 à 3 dernières semaines de grossesse lorsque l’exposition aux érythrocytes du poulain est susceptible de se produire (en cas d’incompatibilité, la jument aura une réponse anamnestique à l’antigène, entraînant un titre élevé en anticorps). Certains auteurs recommandent de répéter l’appariement croisé toutes les deux semaines au cours du dernier mois de la grossesse pour rechercher un titre croissant (augmente souvent de < 1:4 à >1:256 au cours des quatre dernières semaines avant la mise bas)., Une augmentation du titre indique une forte probabilité de NI et révèle la nécessité de retenir le colostrum du poulain.
alternativement, le test d’agglutination du poulain de jaunisse peut être utilisé à la parturition et le colostrum peut être retenu. Notez qu’un seul croisement entre une jument et un étalon peut ne pas révéler d’incompatibilité si la jument est testée avant ou au début de la grossesse (en raison de faibles titres d’anticorps qui peuvent ne pas produire de réaction incompatible)., Étant donné que le test d’incompatibilité jument-étalon nécessite des globules rouges de l’étalon (sang EDTA), ce qui peut être difficile à obtenir, une approche alternative pour déterminer si la jument va probablement développer des anticorps contre les globules rouges du poulain (avec le groupe sanguin du Père), le sérum de la jument peut être testé contre un panel d’antigènes RBC pour la présence d’anticorps, ce qui est fait dans des centres spécifiques (voir liens connexes)., Encore une fois, ce test doit être effectué aussi près que possible de la mise bas, lorsque la jument est susceptible de développer une réponse anamnestique (une réponse accrue après une nouvelle exposition à l’antigène primaire des globules rouges) à partir d’un type de globules rouges incompatible sur le sang du poulain (voir ci-dessus). Lorsqu’une jument a eu un poulain NI et est accouplée à nouveau avec le même étalon, il y a 50% de chances que le prochain poulain soit à risque de NI (s’il hérite du type de globules rouges du Père). Dans ce cas, il est toujours plus sûr de retenir le colostrum du poulain., Si la jument est accouplée à un nouvel étalon, le typage de la jument et de l’étalon est idéal pour déterminer s’ils ont des groupes sanguins incompatibles. En effet, une fois qu’une jument a eu un poulain avec NI, il est toujours bon de déterminer le groupe sanguin de la jument et l’antigène incriminé probable afin que les accouplements futurs puissent être gérés de manière appropriée. Le seul avantage d’un croisement a contre l’approche spécifique de titre d’anticorps est qu’il peut ramasser des incompatibilités de groupe sanguin contre des antigènes qui ne sont pas dans un panneau de dépistage., Cependant, il y a un faible risque qu’un anticorps anti-RBC soit omis parce que le sérum est testé contre les antigènes érythrocytaires fautifs courants et que les rapports d’autres antigènes associés au NI sont rares. Les deux tests (correspondance croisée et titres d’anticorps) ont le potentiel de manquer de faibles niveaux d’anticorps. C’est pourquoi il est essentiel de tester la jument au plus près de la mise bas.