Animalele au fost folosite în producția industrializată de vaccinuri umane de vaccin ferme au fost stabilite pentru a recolta virusul cowpox de viței la sfârșitul anilor 1800. Din acel moment, și prin prima jumătate a secolului 20, cele mai multe vaccinuri ar continua să fie dezvoltat cu utilizarea de animale, fie prin creșterea de agenți patogeni la animale vii sau prin utilizarea de celule animale.deși multe vaccinuri și produse anti-toxină au fost dezvoltate cu succes în acest fel, utilizarea animalelor în dezvoltarea vaccinului – în special a animalelor vii – nu este ideală., Animalele de cercetare sunt costisitoare și necesită o monitorizare extinsă, atât pentru a-și menține sănătatea, cât și pentru a asigura viabilitatea continuă a cercetării. Acestea pot transporta alte bacterii sau virusuri care ar putea contamina eventualul vaccin, ca și în cazul vaccinurilor polio de la mijlocul secolului 20, care au fost făcute cu celule de maimuță și, în cele din urmă, s-a constatat că conțin un virus de maimuță numit SV40 sau virusul Simian 40. (Din fericire, virusul nu a fost găsit a fi dăunătoare pentru oameni.) Mai mult, unii agenți patogeni, cum ar fi virusul varicelei, pur și simplu nu cresc bine în celulele animale., chiar și atunci când dezvoltarea vaccinului se face folosind produse de origine animală și nu animale vii – cum ar fi creșterea virusurilor vaccinului gripal în ouăle de pui – dezvoltarea poate fi împiedicată sau chiar oprită dacă disponibilitatea produselor de origine animală scade. Dacă o boală ar lovi puii care produc ouă, de exemplu, ar putea produce prea puține ouă pentru a fi utilizate în dezvoltarea vaccinului antigripal sezonier, ceea ce duce la o lipsă gravă de vaccin. (Este o concepție greșită comună că vaccinurile antigripale ar putea fi produse mai rapid dacă sunt cultivate în culturi celulare în comparație cu utilizarea ouălor de pui embrionate., De fapt, creșterea virusurilor vaccinului în culturile celulare ar dura aproximativ aceeași perioadă de timp. Cu toate acestea, culturile celulare nu au aceleași probleme potențiale de disponibilitate ca ouăle de pui.din aceste motive și din alte motive, utilizarea tehnicilor de cultură celulară pentru a produce virusuri vaccinale în tulpinile de celule umane reprezintă un progres semnificativ în dezvoltarea vaccinului.

cum funcționează culturile celulare

culturile celulare implică celule în creștere într-un vas de cultură., O cultură de celule primare constă din celule prelevate direct din țesutul viu și niciodată subcultivate și pot conține mai multe tipuri de celule, cum ar fi fibroblaste, celule epiteliale și endoteliale.

o tulpină celulară este o cultură celulară care conține un singur tip de celulă în care celulele sunt normale și au o capacitate finită de a se replica. Tulpinile celulare pot fi făcute prin luarea subculturilor dintr-o cultură originală, primară, până când rămâne un singur tip., Culturile primare pot fi manipulate în mai multe moduri diferite pentru a izola un singur tip de celulă; filarea culturii într-o centrifugă poate separa celulele mari de cele mici, de exemplu. O linie celulară imortalizată este o cultură celulară a unui singur tip de celulă care se poate reproduce pe termen nelimitat. În mod normal, celulele sunt supuse Limitei Hayflick, o regulă numită pentru biologul celular Leonard Hayflick, PhD. Hayflick a stabilit că o populație de celule umane normale se va reproduce doar un număr finit de ori înainte de a înceta să se reproducă., Cu toate acestea, unele celule din cultură au suferit o mutație sau au fost manipulate în laborator, astfel încât să se reproducă pe termen nelimitat. Un exemplu de linie celulară imortalizată este așa-numita linie celulară HeLa, pornită de la celulele canceroase de col uterin luate în anii 1950 de la o femeie pe nume Henrietta Lacks. Liniile celulare nu sunt utilizate pentru a produce virusul vaccinului.cercetătorii pot crește agenți patogeni umani ca virușii din tulpinile celulare pentru a le atenua – adică pentru a le slăbi., O modalitate prin care virusurile sunt adaptate pentru utilizare în vaccinuri este de a le modifica astfel încât să nu mai poată crește bine în corpul uman. Acest lucru se poate face, de exemplu, prin creșterea repetată a virusului într-o tulpină de celule umane menținută la o temperatură mai scăzută decât temperatura normală a corpului. Pentru a continua replicarea, virusul se adaptează pentru a deveni mai bun la creșterea la temperatura mai scăzută, pierzându-și astfel capacitatea inițială de a crește bine și de a provoca boli la temperaturi normale ale corpului., Mai târziu, când este folosit într-un vaccin și injectat într-un corp uman viu la temperatură normală, încă provoacă un răspuns imun, dar nu se poate replica suficient pentru a provoca boli.primul vaccin autorizat realizat cu utilizarea unei tulpini de celule umane a fost vaccinul adenovirus folosit de militari la sfârșitul anilor 1960. mai târziu, alte vaccinuri au fost dezvoltate în tulpini de celule umane, mai ales vaccinul rubeolic dezvoltat de Stanley Plotkin, MD, la Institutul Wistar din Philadelphia.,în 1941, oftalmologul Australian Norman Gregg și-a dat seama pentru prima dată că cataractele congenitale la copii au fost rezultatul infectării mamei lor cu rubeolă în timpul sarcinii. Împreună cu cataracta, s-a stabilit în cele din urmă că sindromul rubeolei congenitale (CRS) ar putea provoca, de asemenea, surditate, boli de inimă, encefalită, retard mintal și pneumonie, printre multe alte afecțiuni., La înălțimea unei epidemii de rubeolă care a început în Europa și s-a răspândit în Statele Unite la mijlocul anilor 1960, Plotkin a calculat că 1% din toate nașterile de la Spitalul General Philadelphia au fost afectate de sindromul rubeolei congenitale. În unele cazuri, femeile care au fost infectate cu rubeolă în timpul sarcinii și-au încheiat sarcinile din cauza riscurilor grave cauzate de CRS.în urma unui astfel de avort, fătul a fost trimis la Plotkin la Laboratorul pe care îl dedicase cercetării rubeolei. Testând rinichiul fătului, Plotkin a găsit și a izolat virusul rubeolei., Separat, Leonard Hayflick (care lucra și la Institutul Wistar la acea vreme) a dezvoltat o tulpină celulară numită WI-38 folosind celule pulmonare de la un făt avortat. Hayflick a descoperit că mulți viruși, inclusiv rubeola, au crescut bine în WI-38 și a arătat că s-a dovedit a fi lipsit de contaminanți și sigur de utilizat pentru vaccinurile umane. Plotkin a crescut virusul rubeolei pe care l-a izolat în celulele WI-38 păstrate la 86°F (30°C), astfel încât în cele din urmă a crescut foarte slab la temperatura normală a corpului. (El a ales abordarea temperaturii scăzute în urma experiențelor anterioare cu atenuarea poliovirusului.,) După ce virusul a fost crescut prin celule de 25 de ori la temperatura mai scăzută, nu mai era capabil să se reproducă suficient pentru a provoca boală la o persoană vie, dar era încă capabil să provoace un răspuns imun protector. Vaccinul împotriva rubeolei dezvoltat cu WI-38 este încă utilizat în mare parte a lumii astăzi ca parte a vaccinului combinat MMR (rujeolă, oreion și rubeolă).deși acum a fost folosit în Statele Unite pentru mai mult de 30 de ani, vaccinul împotriva rubeolei Plotkin a fost inițial ignorat de SUA, Administrarea alimentelor și medicamentelor în favoarea vaccinurilor împotriva rubeolei s-a dezvoltat folosind celule embrionare de rață și celule renale de câine. La sfârșitul anilor 1960, în țară a existat îngrijorarea că un vaccin dezvoltat folosind celule umane ar putea fi contaminat cu alți agenți patogeni, deși această preocupare nu a fost susținută de dovezi documentate. Acest lucru este interesant în lumina descoperirii la începutul deceniului că vaccinurile polio dezvoltate folosind celule renale primare de maimuță au fost contaminate cu virusuri simian: acesta a fost unul dintre motivele pentru care cercetătorii au început să utilizeze tulpina normală a celulelor umane WI-38 în primul rând., Potrivit Hayflick, cu toate acestea, principalul motiv pentru utilizarea WI-38 a fost faptul că ar putea fi depozitat în azot lichid, reconstituit și testat temeinic înainte de utilizare pentru contaminarea virușilor. (Nici unul nu a fost găsit vreodată în WI-38. Celulele renale primare de maimuță nu au putut fi înghețate și apoi reconstituite pentru testare, deoarece acest lucru ar încălca conceptul de celule primare-inițial singura clasă de celule permise de FDA pentru a produce vaccinuri împotriva virusului uman.,după testare, vaccinul Plotkin a fost licențiat pentru prima dată în Europa în 1970 și a fost utilizat pe scară largă acolo, cu un profil puternic de siguranță și o eficacitate ridicată. În lumina acestor date, și de mai mare efect secundar profile cu alte două rubeola vaccinuri, a fost licențiat în Statele Unite în 1979 și a înlocuit rubeolic componentă care anterior fuseseră folosite pentru Merck ROR (rujeola, oreion, rubeola) vaccin combinat. În 2005, CDC a declarat că rubeola a fost eliminată din Statele Unite, deși amenințarea din cazurile importate rămâne., Organizația Mondială a Sănătății a declarat America liberă de rubeolă în 2015.grupurile care se opun avortului au ridicat întrebări etice despre vaccinul rubeolic al lui Plotkin (și alte vaccinuri dezvoltate cu tulpini similare de celule umane) de-a lungul anilor.din cauza poziției sale cu privire la avort, unii membri ai Bisericii Catolice au cerut îndrumări morale cu privire la utilizarea vaccinurilor dezvoltate folosind tulpini celulare începute cu celule fetale umane. Acestea includ vaccinul împotriva rubeolei, precum și cele împotriva varicelei și hepatitei A și alte vaccinuri., Poziția oficială conform Centrului Național de Bioetică Catolică este că indivizii ar trebui, atunci când este posibil, să utilizeze vaccinuri care nu sunt dezvoltate cu utilizarea acestor tulpini de celule umane. Cu toate acestea, în cazul în care singurul vaccin disponibil împotriva unei anumite boli a fost dezvoltat folosind această abordare, NCBC note:

Unul este din punct de vedere moral gratuit pentru utilizarea vaccinului indiferent de istoric de asociere cu avortul. Motivul este că riscul pentru sănătatea publică, dacă se alege să nu se vaccineze, depășește îngrijorarea legitimă cu privire la originea vaccinului., Acest lucru este deosebit de important pentru părinți, care au obligația morală de a proteja viața și sănătatea copiilor lor și a celor din jurul lor.

NCBC ia act de faptul că Catolicii ar trebui să încurajeze companiile farmaceutice pentru a dezvolta în viitor vaccinuri fără utilizarea acestor celule sușe., Pentru a aborda preocupările legate de celulele fetale rămânând ca real ingredientele din vaccinuri, cu toate acestea, în mod special rețineți că celulele fetale au fost folosite doar pentru a începe celula tulpini care au fost utilizate la prepararea virusului din vaccin:

Descendent celulele sunt mediu în care aceste vaccinuri sunt preparate. Liniile celulare luate în considerare au început să utilizeze celule prelevate de la unul sau mai mulți fetuși avortați cu aproape 40 de ani în urmă. De atunci, liniile celulare au crescut independent. Este important de menționat că celulele descendente nu sunt celulele copilului avortat., Ei niciodată, ei înșiși, nu au format o parte din corpul victimei.

în total, doar doi fetuși, ambii obținuți din avorturi efectuate la alegere maternă, au dat naștere tulpinilor de celule umane utilizate în dezvoltarea vaccinului. Nici avortul nu a fost efectuat în scopul dezvoltării vaccinului.

vaccinuri actuale dezvoltate folosind tulpini de celule umane

două tulpini principale de celule umane au fost utilizate pentru a dezvolta vaccinuri disponibile în prezent, în fiecare caz cu celulele fetale originale în cauză obținute în anii 1960., Tulpina de celule WI-38 a fost dezvoltată în 1962 în Statele Unite, iar tulpina de celule MRC-5 (începută și cu celule pulmonare fetale) a fost dezvoltată, folosind tehnologia Hayflick, în 1970 la Centrul de Cercetare Medicală din Regatul Unit. Ar trebui remarcat faptul că Hayflick metode implicate de instituire a unui mare banca de WI-38 și MRC-5 celule care, deși nu este capabil de infinit replicarea ca nemuritor linii celulare, va servi producția de vaccin are nevoie de mai multe decenii în viitor.vaccinurile de mai jos au fost dezvoltate utilizând fie tulpinile de celule WI-38, fie tulpinile de celule MRC-5.,cercetătorii au estimat că vaccinurile făcute în WI-38 și derivații săi au prevenit aproape 11 milioane de decese și au prevenit (sau tratate, în exemplul rabiei) 4, 5 miliarde de cazuri de boală.mai multe vaccinuri disponibile în prezent în Statele Unite au fost dezvoltate folosind tulpini de celule animale, folosind în principal celule de la maimuțe verzi africane. Acestea includ vaccinuri împotriva encefalitei japoneze, rotavirusului, poliomielitei și variolei. Dintre acestea, se administrează în mod obișnuit numai vaccinuri cu rotavirus și poliomielită.,

surse și Lectură suplimentară

Alberts, B., Johnson, A., Lewis, J., și colab. Biologia moleculară a celulei. Ediția a 4-a. New York: Garland Science; 2002.

Barr Labs. (2011). Prospect – vaccin Adenovirus tip 4 și tip 7, viu, Oral. (179 KB). Accesat 01/10/2018.

GlaxoSmithKline. (2011). Prospect – Havrix. (123 KB). Accesat 01/10/2018.Hayflick, L. corespondență personală. Aprilie 2017.

Merck & Co, Inc. (2009). Prospect – vaccin viu împotriva rujeolei, oreionului și rubeolei. (196 KB). Accesat 01/10/2018.,

Merck & Co, Inc. (2006). Package Insert – MERUVAX II. (88.6 KB). Accessed 01/10/2018.

Merck & Co, Inc. (2010). Package Insert – Refrigerator-Stable Formulation – ProQuad. (448 KB). Accessed 01/10/2018.

Merck & Co, Inc. (2017). Package Insert — Rotateq. (88.6 KB). Accessed 01/10/2018.

Merck & Co, Inc. (2011). Package Insert – VAQTA – Hepatitis A Vaccine, Inactivated. (332 KB). Accessed 01/10/2018.

Merck & Co, Inc. (2010)., Package Insert – Varivax (Frozen). (220 KB). Accessed 01/10/2018.

Merck & Co, Inc. (2011). Package Insert – Zostavax. (159 KB). Accessed 01/10/2018.

National Catholic Bioethics Center. (2006). FAQ on the Use of Vaccines. Accessed 01/10/2018.

Sanofi Pasteur. (2009). Package Insert – ACAM2000. (285 KB). Accessed 01/10/2018.

Sanofi Pasteur. (2013). Package Insert – IMOVAX. (213 KB). Accessed 01/10/2018.

Sanofi Pasteur. (2015). Package Insert – IPOL. (213 KB). Accessed 01/10/2018.

Sgreccia, E. (2005)., Declarație a Academiei Pontificale pentru viață, inclusiv traducerea în limba engleză a ” reflecții morale asupra vaccinurilor preparate din celule derivate din fetușii umani Avortați.”Accesat 01/10/2018.pentru a citi PDF-uri, descărcați și instalați Adobe Reader.

Ultima actualizare 10 ianuarie 2018